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WEPRO 7240无细胞蛋白表达试剂盒 (CFS-C7)

发布时间: 2023-02-23   

本系列试剂盒能够通过质粒模板实现蛋白的大量表达。本系列试剂盒采用转录和翻译非偶联的方法,试剂盒中提供 SP6RNA 聚合酶, NTPRNase Inhibitor 以及 Transcription Buffer LM,加入模板后先完成 DNA 的转录,再配合麦胚无细胞蛋白表达系统预混 mix 完成 mRNA 的翻译,该 mix 中包含蛋白翻译的所有必需酶类、各种 tRNA 和离子,从而获取目的蛋白。本系列试剂盒可选择小、中、大三种表达规模,利用双层液相反应法(Bilayer)表达目的蛋白,小规模反应蛋白表达纯化后可达 500 μg 左右,大规模表达可达 4 mg,非常适合 Western BlotCBB 染色等蛋白检测实验和蛋白结构解析以及免疫共沉淀、酶功能检测、抗体检测等常见蛋白质功能解析。特别地,本系列试剂盒还支持多个质粒模板在一个体系中同时表达,并且可以在表达之后正确模拟体内的蛋白复合体自组装。此外,本系列中的 C7H  C7G 试剂盒专门为表达 His 标签蛋白和 GST 标签蛋白做特殊优化,使得纯化后的蛋白纯度更高。

产品特点

■ 操作简单:采用 Bilayer 反应方法,不需要特殊仪器,只需加入模板即可进行反应

■ 体系灵活:可以根据后续应用自由选择小、中、大三种不同的表达规模

■ 功能模拟:可以同时表达多个蛋白,并且表达之后的蛋白可以正确模拟体内相互结合的情况

■ 表达高效:一天内完成蛋白表达,蛋白表达量可达 0.5-4 mg

■ 适用面广:特别针对 His 标签蛋白或 GST 标签蛋白的表达进行特殊优化,提高纯度

下游应用

可用于考马斯亮蓝染色、Western Blot 检测等下游蛋白检测实验。蛋白经纯化后,可用于EMSAIP等常规蛋白结构和功能验证等实验,也可同时表达多个蛋白,模拟蛋白互作或复合体组装的研究。

实验结果

使用WEPRO 7240G/H 试剂盒分别小规模表达多个GST 标签蛋白和His标签蛋白,用考马斯亮蓝(CBB)染色检测(PAGE 图)蛋白表达量,并用对应方法纯化后,检测蛋白得率和纯度。结果显示,WEPRO 7240G/H表达蛋白成功率高,纯化后蛋白得率可达300-600 μg,纯度高,适合下游各类蛋白结构和功能研究。