培养细胞的诀窍有哪些

发布时间： 2019-05-24   

细胞可是许多生物学实验的主角。假如细胞长不好，那么实验的结果也不会好到哪儿去。细胞可是许多生物学实验的主角。在此引见了让细胞快乐的十个窍门。
1. 确保一切实验室资料都无菌 穿插污染是细胞培育的大敌。即便是最细微的污染，也可能毁了几个星期的成果。因培育箱内暖和湿润，真菌极易生长，因而必需留意定期清洁。此外，在将培育瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前，应用酒精擦拭洁净，以防止污染。 2. 当心处置您的培育物 细胞培育的脆弱性怎样强调也不为过。猛烈摇摆，或连续的温度动摇可能会对生长产生不利的影响。确保培育箱是程度的，温度均一，且远离电动仪器。此外，尽量防止一次处置多个细胞系，由于它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定期完成STR图谱剖析，以确认细胞系的身份。
3. 在运用前正确冻结细胞 虽然冻结看起来是个简单的步骤，但必需操作得当，以免伤害细胞。长时间暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因而，冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟，然后用条件培育基稀释，以防止DMSO形成直接伤害。
4. 运用对数生长期的细胞 细胞培育过程共有3个阶段：停滞期、对数期战争台期，分别代表了低细胞生长、高细胞生长和无细胞生长。最有生机的细胞是安康的，快速团结的，在对数期以70-80%的集合度存在。
5. 在传代之前不要让细胞完整集合 集合度是指贴壁细胞占领培育瓶外表积的比例。完整集合意味着100%的外表都被贴壁细胞掩盖。一定要防止这种状态，由于它意味着细胞不能继续生长。不过，燃眉之急是运用活泼生长的细胞。
6. 选择最*的培育基开发战略 在细胞培育过程中，培育基是控制产质量量、产量和本钱的最重要要素。必需针对每种培育物来定制培育基，以优化实验结果。在决议以哪种方式来开发您的培育基时，您有几个选择。您能够购置现成的，本人开发，也能够与另一家公司协作开发特定的培育基。在这个过程中，您需求思索时间和本钱等要素。
7. 配制干粉培育基时评价水的质量 液体培育基常常会带来比干粉培育基更高质量的结果。这可能与水的质量有关。由于细菌在水中疾速生长，故需求监控内毒素及其他污染物。商业公司有资源来监控和控制细菌生长，比方过滤器。因而运用商业化消费的液体培育基会愈加牢靠一点。
8. 应用细胞的代谢特性来优化培育基 剖析运用过的培育基，有助于审定必要成分的代谢速率，包括氨基酸和维生素。从细胞生长阶段和蛋白消费阶段搜集到的动态代谢图谱可用来均衡根底培育基和添加培育基，指导培育基的重点，有助于蛋白质的消费。
9. 防止细胞的过度消化 胰蛋白酶经过消化担任让细胞与容器分离的蛋白质，而完成贴壁细胞的传代。假如细胞暴露在胰酶中时间太长，则胰酶将开端切割细胞外表蛋白，这会影响细胞行驶正常功用的才能。
10. 培育基中不要不断运用抗生素 随着细胞培育物愈加频繁地暴露在抗生素中，对立生素有着自然耐药性的菌株将开端呈现。这种现象可掩盖潜在的污染。