细胞培养基相关知识介绍

发布时间： 2019-05-24   

基本知识
1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱，避免光照，实验进行前放在37度水槽中温热。 
2. 液体培养基（加血清） 寄存期为六个月，期间glutamine 可能会分解，若细胞生长欠安，可以再添加适量glutamine。 
制作参数
粉末培养基制作（以1 升为例）： 
1. 细胞培养基通常须添加10 % 血清，因此粉末培养基之制作体积为900 ml，pH 为 7.2 - 7.4。NaHCO3 为其他添加，若将NaHCO3 粉末直接参加液体培养基中会造成 pH 之误差，或部分过碱。因此粉末培养基及NaHCO3 粉末应分别溶解后才混合，然后用CO2 气体调整pH，而非用强酸（HCl）或强碱（NaOH），因为氯离子对细胞生长可能有影响，且贮存时培养基的pH 易发生改动。 
2. 资料： 
2.1. 纯水（milli-Q 水或二次至三次蒸馏水，水质量非常重要） 
2.2 粉末培养基 
2.3 NaHCO3 （Sigma S-4019） 
2.4 电磁搅拌器 
2.5 无菌血清瓶 
2.6. 0.1 或0.2 mm无菌过滤膜 
2.7. pH meter 
2.8. 真空帮浦 
2.9. CO2 气体