2×RealStar Green Fast Mixture大量现货

发布时间： 2020-04-20   

2×RealStar Green Fast Mixture

货号	产品规格	销售价(RMB)	库存
XY301-01	1.1 ml	286	现货
XY301-05	1.1 ml x 5	1287	现货
XY301-10	1.1 mlx 10	2285	现货

本产品是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行实时荧光定量PCR的专用2×浓度预混液。产品含有优化浓度的GenStar HotStart Taq DNA Polymerase、SYBR Green I、dNTPs、Mg²⁺、反应缓冲液和稳定剂等成分。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的检测。HotStart Taq DNA Polymerase高温加热前，抗Taq单克隆抗体与Taq酶结合，抑制Taq酶的聚合酶活性，从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应第一循环的变性步骤中已完全失活，不会阻碍之后的Taq Polymerase反应，大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性。优化浓度的SYBR Green I 荧光染料，特异性地掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中SYBR Green I染料分子荧光信号不变，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步，荧光可以在退火或延伸阶段测定。
本产品为2×预混荧光定量PCR反应体系，使用时只需加入模板、引物和水，使其工作浓度为1×,即可进行反应。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度地减少人为误差、节约PCR实验操作时间、降低污染几率。
【产品规格及组分】

产品名称	货号
2×RealStar Green Mixture	XY301-01	1.1 ml
	XY301-05	1.1 ml x 5
	XY301-10	1.1 ml x 10
2×RealStar Green Mixture with ROX	XY303-01	1.1 ml
	XY303-05	1.1ml x 5
	XY303-10	1.1 ml x 10
2×RealStar Green Mixture with ROX II	XY304-01	1.1 ml
	XY304-05	1.1 ml x 5
	XY304-10	1.1 ml x 10

*注：各个产品适用的机型如下：

A301: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler System，Corbett Rotor-gene6000,Mastercycler?eprealplex,LightCycler480,CFX96TM,CFX384TM荧光定量PCR仪等。

A303: ABI Prism7000/7300/7700/7900HT和ABI Step One /ABI Step One Plus荧光定量PCR仪。

A304: ABI Prism7500/7500 Fast荧光定量PCR仪 , MJ Research Chromo4,Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000 , Agilent Technologies Mx3000P荧光定量PCR仪。
【注意事项】
1. 使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2. 尽可能减少RealStar Green Mixture在光下的曝露时间，长时间的曝光可导致荧光信号强度的丧失。
3. 本品不能用于杂交探针法。
2×RealStar Green Fast Mixture
2×预混实时荧光定量快速 PCR 反应体系
【产品概述】 本产品是采用 SYBR Green I 嵌合荧光法进行实时荧光定量 PCR 的专用 2×浓度增强型预混液。本产品含 有优化浓度的 HotStart Taq DNA Polymerase、SYBR Green I、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液和稳定剂等 成分。主要用于基因组 DNA 靶序列和 RNA 反转录后 cDNA 靶序列的检测。HotStart Taq DNA Polymerase 高温加热前，抗 Taq 单克隆抗体与 Taq 结合，抑制 Taq 的聚合酶活性，从而抑制在低温条件下出现的由 引物和模板 DNA 非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗体在 PCR 反应的预变性步骤中已 完全失活，不会阻碍之后 Taq Polymerase 反应，大大提高了 PCR 反应的灵敏度及特异性。 优化浓度的 SYBR Green I 荧光染料，特异性地掺入 DNA 双链后，荧光信号增强，而不掺入链中 SYBR Green I 染料分子荧光信号不变，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步，荧光可以在退 火或延伸阶段测定。
本产品为 2×预混增强型荧光定量 PCR 反应体系，使用时只需加入模板、引物、ROX Reference Dye（用 以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差，根据不同荧光定量 PCR 仪选择使用）和水，使其工作浓度为 1×， 即可进行反应。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度地减少人为误差、节 约 PCR 实验操作时间、降低污染几率。
【产品规格及组分】

组分名称	XY301-01	XY301-05	XY301-10
2 x RealStar Green Fast Mixture	1.1 ml x 1 支	1.1 ml x 5 支	1.1 ml x 10 支
*ROX Reference Dye/ROX Reference Dye II	44 μl	220 μl	220 μl x 2

*注：不同仪器所需 ROX Reference Dye 不同，如需添加，需致电本公司或向服务您的销售人员索取： 需加 ROX Reference Dye (50×)的机型:ABI Prism7000/7300/7700/7900HT 和 ABI Step One /ABI Step One Plus。 需加 ROX Reference Dye II (50×)的机型:ABI Prism7500 /7500 Fast , MJ Research Chromo4,Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000 , Agilent Technologies Mx3000P。 无需加 ROX Reference Dye 的机型: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler System，Corbett Rotor-gene 6000 等荧光定量 PCR 仪。
【注意事项】 1. 使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。 2. 尽可能减少 RealStar Green Fast Mixture 在光下的曝露时间，长时间的曝光可导致荧光信号减弱。 3. 反应液的配制、分装请一定使用无污染的枪头、Microtube 等，尽量避免交叉污染。 4. 本品不能用于杂交探针法。 【保存条件】 -20℃恒温避光保存一年，避免反复冻融。如果经常使用，可置于 4℃保存至少三个月。
【使用方法】 用户需自备的试剂：cDNA 或 DNA 模板、引物。 请按照不同品牌荧光定量PCR仪的使用说明书要求进行实验操作。 操作示例： 分别以20 μl和50 μl PCR反应体系为例 1. PCR反应体系的建立：

试剂	使用量	使用量	终浓度
DNA模板	0.4 μl	1 μl	*
正向引物 (10 μM)	0.4 μl	1 μl	0.2 μM**
反向引物 (10 μM)	0.4 μl	1 μl	0.2 μM**
2×RealStar Green Fast Mixture	10 μl	25 μl	1×
ROX Reference Dye（50×）or ROX Reference Dye II （50×）***	0.4 μl	1 μl	1×
RNase-free H2O	补足至 20μl	补足至 50μl	****

模板量：10~100 ng基因组DNA，或1~10 ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模 板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。另外，two Step RT-PCR反应的cDNA（RT反应液）作为模板时的添加 量不要超过PCR反应液总体积的10%。 ?? 引物：通常引物浓度以0.2 μM可以得到较好结果，可以终浓度0.1~1.0 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况 下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。为了获得理想的qPCR的效果， 扩增片段的长度建议为80~200 bp。 ??? 不同仪器所需 ROX Reference Dye 不同，或需要添加或不需要添加，请根据仪器说明进行操作。 ???? 按照各仪器推荐体系进行反应液配制。 2. PCR 反应条件的设置： 本制品中使用的 HotStart Taq DNA Polymerase 是利用抗 Taq 抗体封闭的 Hot Start DNA 聚合酶，如果 在 PCR 反应前进行模板的预变性，通常设定为 95℃、2 min，复杂或高 GC 模板适当延长时间至 5 min。 该 DNA 聚合酶在 15 sec 内可完成至少 300 bp 的扩增，可以满足绝大多数的 qPCR 实验；对于超过 350 bp 或者高 GC 含量的扩增子，建议增加延伸时间至 60 sec 或者采用三步法以提高扩增效率 。 两步法 PCR 扩增标准程序： 三步法 PCR 扩增程序： 95℃ 2 min 95℃ 2 min 95℃ 15 sec 40 Cycles 95℃ 15 sec 60℃ 15~30 sec 60℃ 15~30 sec 40 Cycles 溶解曲线（仪器自动设置） 72℃ 30 sec 溶解曲线（仪器自动设置） 注： 以上举例为常规qPCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根 据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系 【备注】 本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。在 所有情况下，本公司对此产品所承担的责任，仅限于此产品的价值本身。