产品简介

本试剂盒能够通过线性模板或质粒模板实现小规模蛋白表达。本试剂盒采用转录和翻译偶联的方法，试剂盒中提供麦胚无细胞蛋白表达系统预混mix，mix中包含蛋白转录、翻译的所有必需酶类、tRNA和离子环境，只需加入DNA模板即可一步完成蛋白的转录和翻译，直接获取目的蛋白。此外，试剂盒中还包括线性模板构建所需PCR引物，以及pEU-01-DHFR质粒作为阳性对照，另提供带有荧光标记的赖氨酸-tRNA，用以标记合成蛋白，便于观测。本试剂盒利用双层液相反应法（Bilayer）表达目的蛋白，只需1-4小时即可观察到目的蛋白，每个反应蛋白表达量为1-3 μg，除了可以应用于Western蛋白检测实验之外，还可作为模板测试试剂，快速检测目的质粒或片段能否成功表达目的蛋白。能够在本试剂盒表达成功的模板质粒或片段，可直接应用于CFS系列其他试剂盒中，做大量蛋白表达使用。

产品特点

选择方便：可用质粒模板，也可直接使用PCR片段进行蛋白表达

操作简单：采用Bilayer 反应方法，不需要特殊仪器，只需加入模板即可进行反应

表达快速：1-4小时即可观察到目的蛋白表达

检测容易：可选择使用荧光标记的Lys-tRNA，用过荧光直接检测蛋白表达效果

储存条件

低于-70℃保存，避免长期存放于干冰环境，反复冻融不超过2次

实验例

使用质粒作为表达模板时，可以使用pEU系列质粒作为表达载体，将带有起始密码子和终止密码子的cDNA克隆至载体上，提取质粒后直接用于蛋白表达。亦可使用其他带有SP6启动子的表达载体进行蛋白表达，不要使用T7启动子。

使用PCR片段做表达模板时，应使用两步PCR反应，将核糖体结合位点和转录启动子作为上游引物的5’端，经PCR反应结合到片段上。片段纯化后可用于蛋白表达。