TRIS-EDTA Antigen Retrieval Solution (50×) pH8.0

TRIS-EDTA抗原修复液（50×）pH8.0

产品简介：EDTA抗原修复液是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，组织中的许多氨基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。因此，对于石蜡切片，要求在进行IHC染色前，先进行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。EDTA缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC抗原修复液。有部分抗原用EDTA缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。特别是对于某些核抗原效果会更明显。

本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA，可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

本产品可以配制成5000ml抗原修复液（1×）。按照每个玻片需要10ml抗原修复液（1×）计算，本产品可用于500个样本的抗原修复。

使用方法（参考）：

一．石蜡切片

      A脱蜡：

（1）浸泡在二甲苯中3次，每次3～5min，每次更换新的二甲苯。

（2）无水乙醇脱水2次，每次3～5min。

（3）95%乙醇3-5min。

（4）90%乙醇3-5min。

（5）70%乙醇3-5min。

（6）馏水冲洗两次，每次3～5min。

B抗原修复：

（1）用去离子水或双蒸水稀释TRIS-EDTA抗原修复液（50×）至1×，例如1ml TRIS-EDTA抗原修复液(50×)加入49ml去离子水，混合均匀，即可得1× TRIS-EDTA抗原修复液。

（2）抗原修复液(1×)使用前需预热至95℃。

（3）将切片浸泡在抗原修复液（1×）中，95-100oC加热约20分钟。

C冷却至室温后，免疫染色洗涤液洗涤1～2次，每次3～5分钟。

D进行封闭等后续的免疫染色步骤。

二．冰冻切片

（1）用去离子水或双蒸水稀释TRIS-EDTA抗原修复液（50×）至1×。

（2）免疫染色洗涤液洗涤切片3～5分钟。

（3）将切片浸泡在抗原修复液（1×）中，95℃或沸水加热约20分钟。

（4）抗原修复液（1×）使用前预热至95-100℃。

（5）冷却至室温后，免疫染色洗涤液洗涤1～2次，每次3～5分钟。

（6）进行封闭等后续的免疫染色步骤。

 注意事项：

1、  浸泡在抗原修复液（1×）中，*的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行实验。

2、  如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。

3、  本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，

4、  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

4℃保存，有效期一年。