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Thermo Scientific™ 活化 Ras 沉降和检测试剂盒
- 品牌:国产
- 货号:16117
- 价格: ¥10/盒
- 发布日期: 2021-05-24
- 更新日期: 2023-04-25
产品详请
品牌 | 国产 |
货号 | 16117 |
用途范围 | 科研实验 |
纯度 | % |
保质期 | 一年 |
是否进口 | 否 |
描述
Thermo Scientific 活化 Ras 沉降和检测试剂盒能够通过与 Raf1 蛋白结合结构域的特异性蛋白相互作用选择性地富集和检测 GTP 结合 Ras GTPase。活化 Ras 沉降和检测试剂盒包含纯化的 GST-Raf1 Ras 结合结构域 (RBD)、谷胱甘肽琼脂糖树脂、阳性和阴性对照品(分别为 GTPγS 和 GDP)、裂解/结合/洗涤缓冲液、抗 Ras 抗体、SDS 样品缓冲液、离心柱和收集管。该试剂盒使用 NIH 3T3 细胞的裂解物进行验证,已知该细胞系具有稳健的 Ras 活性。
活化 Ras 沉降和检测试剂盒的特点:
?高灵敏度和精确度—优化试剂、特异性抗 Ras 抗体和 Western 印迹程序可确保精确控制和半定量结果
? 经验证—对 Ras 检测进行功能检测,以确保质量和性能
? 兼容—可有效兼容小鼠、大鼠和人类来源的多种细胞类型
应用:
?追踪细胞分化、迁移、分裂和细胞骨架重排期间的 Ras GTPase 活化
? 研究活化 Ras 在癌症和血管新生中的作用
?监测使用生长因子刺激后的 Ras 活性
?筛查小分子抑制剂对 Ras 活性的影响
使用经用于活化内源性 Ras 的 GTPγS 处理的细胞裂解物相对于经灭活小 GTPase 的 GDP 处理的裂解物,验证了活化 Ras 沉降和检测试剂盒的活化 Ras 富集方法的功能和特异性。GTPγS 处理捕获 GTP 结合活化形式的 Ras,在存在内源性 Ras 时产生强烈信号。GDP 处理使 Ras 进入 GDP 结合的非活化状态,无论 Ras 蛋白水平*均几乎不产生信号。对该试剂盒进行了优化,用于使用 HRP 偶联二抗(山羊抗 小鼠 IgG,产品编号 31430)和 Thermo Scientific SuperSignal West Pico 化学发光底物(产品编号 34080)进行 Western 印迹检测。每个试剂盒均包含足够用于 30 次沉降实验的组成部分。
试剂盒组成部分也可用于免疫荧光染色。使用 NGF 刺激神经元 NS-1 细胞,以使用试剂盒中提供的 GST-RBD 蛋白和抗 Ras 抗体研究活化 Ras 的空间分布。
Ras 背景:
以大鼠肉瘤病毒致癌基因命名的 GTPase 的 Ras 超家族包含多种 Ras 同源异构体,包括 K-Ras、H-Ras 和 N-Ras。虽然三种同源异构体在不同细胞类型中的表达水平有所不同,但是一般而言,在所有癌症中约 15% 存在这些同源异构体中至少一种的激活突变。Ras 蛋白作为来自细胞外分子的细胞内信号转导的启动物,通过羧基端脂质修饰和异戊烯化与质膜相连接。这些羧基端的修饰决定了 Ras 在不同膜微结构域的定位,从而决定后续的下游信号转导。Ras 信号转导通路影响多种细胞过程,包括增殖、存活、囊泡运输和基因表达。
通过 Ras 进行的信号转导对多种细胞反应至关重要,且 Ras 的活化受到 GEF 和 GAP 蛋白的调控。GEF 蛋白通过将 GDP 从非活化 Ras 中解离来介导 GTPase 活化,以使 Ras 结合到 GTP 上。相反,GAP 蛋白通过将 GTP 水解为 GDP 灭活 GTPase。Ras 通过与效应蛋白(包括 Raf 和 PI3 激酶)相互作用来介导下游信号转导。Raf1 是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是 MAP 激酶激酶信号转导通路的一部分,该通路可活化 ERK 和 p38,从而影响增殖和存活。PI3 激酶信号转导可使 AK 活化
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
规格
检测: | 蛋白定量检测 |
---|---|
Substrate Properties: | 基于蛋白的底物 |
底物类型: | GTPase 底物 |
描述: | Pierce 活化 Ras 沉降和检测试剂盒 |
适用于(应用): | Pull-Down |
套装内容: | SDS 样品缓冲液 (2X),1.5 mL |
靶标: | Kinases (Multiple), Phosphodiesterases, ATPases, GTPases, Phosphatases |
标签类型: | 未标记 |
免疫测定试剂盒格式: | Spin Column |
检测方法: | Western 印迹、化学发光 |
内容及储存
? GST-Raf1-RBD 融合蛋白,1 瓶
? 抗 Ras 抗体,5 单位,250 μL
? 谷胱甘肽琼脂糖树脂,3 mL
? GDP (100X),50 μL
? GTPyS (100X),50 μL
? SDS 样品缓冲液 (2X),1.5 mL
? 裂解/结合/洗涤缓冲液 (1X),100 mL
? 离心杯,30 cups
? 收集管,90 管
? 抗 Ras 抗体,5 单位,250 μL
? 谷胱甘肽琼脂糖树脂,3 mL
? GDP (100X),50 μL
? GTPyS (100X),50 μL
? SDS 样品缓冲液 (2X),1.5 mL
? 裂解/结合/洗涤缓冲液 (1X),100 mL
? 离心杯,30 cups
? 收集管,90 管