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- 北京杰辉博高生物技术有限公司
- 联系人:杨经理
- 电话:4000610918
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- 地址:北京市海淀区乾通天商务楼
- 品牌:国产/进口
- 产地:北京
- 型号:48T/96T
- 纯度:仅供科研使用
- 价格: ¥1600/盒
- 发布日期: 2014-04-14
- 更新日期: 2023-04-25
供应牛内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒价格
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被牛内皮型一氧化氮合成酶 (eNOS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 牛内皮型一氧化氮合成酶 (eNOS) 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
牛内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 价格,牛eNOS检测试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
牛内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 价格,牛eNOS检测试剂盒
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
牛内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 价格,牛eNOS检测试剂盒
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
牛内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 价格,牛eNOS检测试剂盒
试剂盒组成
名称96孔配置48孔配置备注
微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无
标准品(160U/L)0.6mL0.6mL按说明书进行稀释
标准品稀释液6mL3mL无
样本稀释液6mL3mL无
检测抗体-HRP10mL5mL无
20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
底物A6mL3mL无
底物B6mL3mL无
终止液6mL3mL无
封板膜2张2张无
说明书1份1份无
自封袋1个1个无
注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:160、80、40、20、10、5 U/L
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
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操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
牛内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 价格,牛eNOS检测试剂盒
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:*检测浓度小于1.0 U/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
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免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
北京杰辉博高生物技术有限公司经营各种一线品牌产品: Sigma , Amresco (大量现货), QIAGEN 、 Elisa 试剂盒, Abcam 、 CST , Hyclone 、 Gibco 、 PAA 胎牛血清,实验耗材 -Corning 、 Axygen 大龙移液器、艾本德移液器等知名品牌。货品齐全价格优惠。全国销售热线: 010-57269778 。